Perubatan moden mempunyai kaedah diagnostik khusus yang memungkinkan untuk menentukan etiologi penyakit pada manusia berdasarkan definisi patogen, bahan asing secara genetik yang merangsang tindak balas imun, asid nukleik, serta perubahan alahan dan imun. yang terjadi akibat perbuatannya. Hari ini, RIA digunakan secara meluas dalam imunologi dan virologi, iaitu, radioimmunoassay, matlamat penetapan, komponen, kursus, perakaunan yang, kita akan mempertimbangkan dalam artikel ini. Ujian ini dapat mengesan antigen hasil daripada interaksinya dengan antibodi.
Definisi
RIA ialah kaedah untuk mendiagnosis bahan aktif secara biologi dalam cecair, yang berdasarkan tindak balas antigen dengan antibodi apabila menggunakan bahan analog berlabel radionuklid yang mempunyai sistem pengikatan khas. Selepas interaksi merekakompleks imun terbentuk, yang dipisahkan dan keradioaktifannya dikaji. Adalah diketahui bahawa ujian radioimmunoassay dijalankan menggunakan kit reagen standard.
Setiap reagen dapat menentukan kepekatan satu bahan tertentu. Cecair biologi yang diambil daripada seseorang dicampur dengan reagen, selepas tempoh pengeraman, bahan radioaktif bebas dan terikat diasingkan, kemudian radiometri dijalankan dan hasilnya dikira. Isotop iodin digunakan untuk melabel bahan. Ia ditanda dan ditambah dalam jumlah tertentu.
Permohonan
Analisis radioimun mempunyai aplikasi yang luas dalam perubatan dan mikrobiologi. Ia digunakan untuk mendiagnosis penyakit jantung dan vaskular, penyakit endokrin dan sistem badan yang lain. RIA juga sering digunakan untuk mengenal pasti punca ketidaksuburan, patologi perkembangan janin. Dalam onkologi, analisis ini dijalankan untuk menentukan penanda neoplasma supaya dapat memantau keberkesanan rawatan. Dalam imunologi, RIA digunakan untuk mengkaji kehadiran immunoglobulin, enzim, protein, dan sebagainya dalam darah. Hari ini, analisis ini membolehkan anda mengesan kepekatan pelbagai hormon sehingga sepersejuta satu gram. Oleh itu, analisis darah radioimun digunakan secara meluas dalam kardiologi, onkologi, endokrinologi, ginekologi dan virologi.
Kaedah RIA
Adalah kebiasaan untuk membezakan antara beberapa kaedah analisis, bergantung pada sifatnyareaksi:
- Kaedah tidak berdaya saing dicirikan oleh komponen tindak balas seperti antigen piawai dan boleh dikesan, larutan penimbal, antibodi berlabel isotop, antibodi tertentu yang mengikat pada sorben. Antigen ditambah kepada antibodi untuk diuji. Selepas pengeraman, kompleks antigen-antibodi muncul, sorben dibasuh, antibodi berlabel ditambah, yang mengikat antigen dalam kompleks. Keradioaktifan bergantung pada kepekatan antigen yang sedang diuji.
- Radioimmunoassay yang kompetitif didorong oleh persaingan antigen. Di sini terdapat komponen tindak balas seperti antigen kawalan dan ditentukan, larutan penimbal, antibodi tertentu yang mengikat sorben, serta antigen berlabel isotop. Diagnosis bermula dengan pengenalan antigen yang sedang diperiksa. Kompleks antigen-antibodi terbentuk pada sorben. Kemudian sorben dibasuh, dan antigen berlabel disuntik. Dengan berbuat demikian, ia mengikat antibodi. Dengan bantuan pembilang, tindak balas dan jumlah radioaktiviti diukur. Ia akan berada dalam perkadaran songsang dengan jumlah antigen dalam sampel.
- Kaedah tidak langsung adalah yang paling biasa. Dalam kes ini, radioimunoassay komponen tindak balas mempunyai seperti serum kawalan dan ujian, antigen atau antibodi yang terikat pada sorben, antibodi yang dilabelkan dengan isotop, larutan penimbal. Antibodi atau antigen yang didiagnosis bertindak balas dengan antigen atau antibodi yang terikat pada sorben. Kemudian inkubasi dikeluarkan, antibodi berlabel disuntik, yang mengikatkompleks antigen-antibodi.
Metodologi Analisis
Jadi, radioimmunoassay dijalankan menggunakan reagen khas. Set adalah standard, jadi sebarang ralat atau pelanggaran tidak dibenarkan. Keputusan diagnostik boleh dipercayai. Analisis dijalankan pada waktu pagi, untuk ini mereka mengambil darah vena dari seseorang. Di makmal, serum diasingkan daripada darah, yang akan digunakan untuk RIA. Serum ini dicampur dengan reagen. Campuran yang terhasil diinkubasi pada suhu tertentu dalam termostat.
Isotop bebas dan terikat diasingkan dalam campuran yang terhasil. Selepas itu, bahan yang diterima diperiksa, dan hasilnya dikira. Mekanisme radioimmunoassay mempunyai beberapa pilihan. Teknik yang diterangkan di atas ialah RIA fasa cecair, kerana semua komponen berada dalam keadaan cair. Terdapat RIA dan fasa pepejal, di mana antibodi diletakkan dalam pembawa yang tidak larut dalam cecair.
Ketersediaan diagnostik
Penggunaan kaedah diagnostik ini dalam perubatan semakin popular setiap tahun. Baru-baru ini, radioimmunoassay telah menjadi kaedah diagnostik standard yang boleh ditetapkan oleh doktor apabila membuat diagnosis akhir. Untuk masa yang lama jenis analisis ini dijalankan hanya di makmal, hari ini ia telah menjadi kaedah penyelidikan biasa. Tetapi RIA memerlukan penggunaan peralatan mahal (kaunter gamma), dan kit reagen mempunyai hayat perkhidmatan yang singkat. Semua ini adalah kelemahan utama analisis sedemikian, yang menentukannyakos mahal.
Selain itu, RIA baru-baru ini mula menggantikan kaedah penyelidikan yang lebih moden yang tidak memerlukan interaksi dengan isotop. Ini termasuk immunoassay enzim. Oleh itu, RIA adalah wajar di banyak klinik. Ia telah lama digunakan di bandar besar dan pusat diagnostik, tetapi di hospital biasa di bandar kecil analisis ini boleh dikatakan tidak digunakan kerana kosnya yang tinggi.
Maruah RIA
Radioimmunoassay mempunyai banyak kelebihan. Ia agak spesifik dan mempunyai kepekaan yang tinggi, yang memungkinkan untuk menentukan kehadiran bahan aktif secara biologi dalam kuantiti yang sangat kecil. Analisis ini dijalankan dengan sangat mudah, seseorang hanya perlu menderma darah vena. Keputusan ujian adalah 100% tepat dan bersedia pada hari berikutnya. RIA juga boleh diautomasikan dengan mudah. Oleh itu, analisis ini membolehkan anda mengenal pasti protein yang merupakan bahan buangan bakteria berjangkit, yang menunjukkan kehadiran jangkitan dalam badan.
Diagnosis dalam Virologi
RIA yang paling menjanjikan adalah untuk virologi, kerana ia membolehkan anda mengenal pasti patogen virus dengan cepat. Ini disebabkan oleh fakta bahawa dalam beberapa tahun kebelakangan ini kejadian pelbagai jangkitan telah berkembang, yang merebak pada kelajuan tinggi, menyebabkan kematian di kalangan orang. Ini terutama berlaku untuk negara yang tidak mempunyai tinggipembangunan sosial dan ekonomi (negara-negara Timur Jauh), radioimmunoassay amat diperlukan di sini. Mikrobiologi juga menggunakan kaedah diagnostik ini untuk mengesan penyakit berjangkit yang disebabkan oleh bakteria patogen. Sebagai contoh, RIA digunakan secara meluas untuk mengesan demam kepialu. Pada hari-hari pertama penyakit, sebelum pelantikan rawatan, adalah perlu untuk menjalankan kajian najis dan muntah. Walau bagaimanapun, keputusan diagnostik akan diperolehi selepas masa yang lama. Di sini RIA datang untuk menyelamatkan, analisis membolehkan anda mengenal pasti agen penyebab penyakit dalam masa yang singkat. Seseorang menderma darah, keesokan harinya keputusan kajian sudah siap. Analisis ini membantu dalam membuat diagnosis yang tepat.
Keputusan
Radioimmunoassay pada masa ini merupakan salah satu kaedah diagnostik yang paling sensitif. Ia digunakan untuk menganalisis sebarang bahan yang menentang antibodi boleh diperolehi. Kaedah ini memungkinkan untuk membuat banyak sampel dalam jumlah terkecil cecair yang disiasat, serta merekodkan keputusan dalam masa yang sesingkat mungkin, kerana ia boleh diautomatikkan sepenuhnya. Analisis ini dibangunkan pada tahun 1950-an oleh Solomon Burson. Tiga puluh tahun kemudian, ia menjadi meluas. Sehingga kini, tiada seratus peratus alternatif kepada RIA, kerana analisis mempunyai sensitiviti yang tinggi. RIA digunakan dalam pelbagai cabang perubatan, serta dalam mikrobiologi dan virologi.
Akhirnya
Penggunaan kaedah dalam virologi sangat relevan hari ini, kerana ia memberikeupayaan untuk menyiasat penyebaran jangkitan, membuat diagnosis yang tepat dan menetapkan rawatan khusus. Masalah ini amat relevan bagi negara yang mempunyai tahap pembangunan ekonomi dan sosial yang rendah. Juga, analisis ini membolehkan anda mengesan jumlah hormon dan enzim dalam tubuh manusia. Untuk mendapatkan keputusan yang boleh dipercayai, penyelidik hanya perlu menderma darah untuk analisis. Perubatan tidak berdiam diri, bersama-sama dengan radioimmunoassay, kaedah penyelidikan baharu muncul, tetapi RIA terus menjadi salah satu peneraju dalam diagnostik perubatan.
