Penyelidikan tentang bakteria memerlukan kerja yang teliti dengan pelbagai peralatan dan instrumen. Agar mikroorganisma membiak secepat mungkin dalam keadaan makmal dan dapat mengekalkan aktiviti penting yang normal, media nutrien khas digunakan. Komposisi dan keadaan biofizikalnya sesuai untuk pertumbuhan aktif kultur bakteria.
Media nutrien. Mikrobiologi dan aplikasi lain
Koloni bakteria ditanam di makmal pada piring Petri yang diisi dengan kandungan seperti jeli atau separa cecair. Ini adalah media nutrien, komposisi dan sifatnya sedekat mungkin dengan media semula jadi untuk pertumbuhan tanaman berkualiti tinggi.
Persekitaran sedemikian digunakan dalam penyelidikan mikrobiologi dan dalam makmal diagnostik perubatan. Yang terakhir berfungsi paling kerap dengan sapuan bakteria patogen atau oportunistik, yang kedudukan sistematiknya ditentukan secara langsung dalam institusi.
Semulajadi dan sintetikRabu
Peraturan asas bekerja dengan bakteria ialah pemilihan medium nutrien yang betul. Ia mesti memenuhi pelbagai kriteria, termasuk kandungan unsur mikro dan makro, enzim, nilai keasidan yang tetap, tekanan osmotik, dan juga peratusan oksigen dalam udara.
Media berkhasiat dikelaskan kepada dua kumpulan besar:
- Persekitaran semula jadi. Campuran sedemikian disediakan daripada bahan semula jadi. Ini mungkin air sungai, bahagian tumbuhan, baja, sayur-sayuran, tisu tumbuhan dan haiwan, yis, dsb. Persekitaran sedemikian dicirikan oleh kandungan bahan kimia semula jadi yang tinggi, kepelbagaiannya menggalakkan pertumbuhan kultur bakteria. Walaupun terdapat kelebihan yang jelas ini, persekitaran semula jadi tidak membenarkan penyelidikan khusus dengan strain bakteria tertentu.
- Media sintetik. Mereka berbeza kerana komposisi kimianya diketahui dalam nisbah tepat semua juzuk. Media sedemikian disediakan untuk kultur bakteria tertentu, metabolisme yang diketahui terlebih dahulu oleh penyelidik. Sebenarnya, atas sebab ini, adalah mungkin untuk menyediakan persekitaran sintetik sedemikian untuk pembangunan mikroorganisma. Mereka digunakan untuk menganalisis aktiviti penting bakteria. Sebagai contoh, anda boleh mengetahui bahan apa yang mereka keluarkan ke alam sekitar dan berapa banyak. Mikroorganisma juga akan tumbuh dalam media semula jadi, tetapi adalah mustahil untuk mengesan sebarang perubahan kuantitatif dalam komposisi disebabkan oleh ketidaktahuan tentang perkadaran awal bahan.
Perbezaan-persekitaran diagnostik
Dalam bekerja dengan bakteria, bukan sahaja media nutrien biasa boleh digunakan. Mikrobiologi adalah sains yang luas, dan oleh itu, semasa menjalankan kajian, kadangkala perlu membuat pemilihan mikroorganisma atas sebab tertentu. Penggunaan media diagnostik pembezaan di makmal membolehkan anda memilih koloni bakteria yang dikehendaki pada cawan Petri mengikut tanda biokimia aktiviti pentingnya.
Komposisi persekitaran sedemikian sentiasa termasuk komponen berikut:
1. Nutrien untuk pertumbuhan sel.
2. Substrat (bahan) yang dianalisis.
3. Penunjuk yang akan memberikan warna ciri apabila tindak balas tertentu berlaku.
Contohnya ialah medium nutrien diagnostik pembezaan "Endo". Ia digunakan untuk memilih koloni bakteria yang boleh memecahkan laktosa. Pada mulanya, medium ini mempunyai warna merah jambu. Jika koloni mikroorganisma tidak dapat memecahkan laktosa, ia mengambil warna putih biasa. Jika bakteria boleh memecahkan substrat ini, ia akan bertukar menjadi ciri warna merah terang.
Rabu elektif
Makmal diagnostik selalunya berfungsi dengan swab yang mengandungi pelbagai jenis bakteria. Jelas sekali, untuk kerja yang berkualiti, entah bagaimana perlu memilih koloni yang kita perlukan daripada berpuluh-puluh orang luar. Di sinilah medium pertumbuhan bakteria boleh membantu, yang dirumus secara ideal untuk menyokong hanya satu jenis mikroorganisma.
Sebagai contoh,persekitaran elektif sedemikian hanya sesuai untuk pembiakan Escherichia coli. Kemudian, daripada menyemai banyak bakteria pada hidangan Petri, kita akan melihat hanya koloni Escherichia coli yang sama dan tidak lebih. Sebelum memulakan kerja, adalah perlu untuk mengetahui metabolisme bakteria yang dikaji dengan baik untuk berjaya memilihnya daripada campuran spesies lain.
Media kultur pepejal, separa pepejal dan cecair
Bakteria boleh ditanam bukan sahaja pada substrat pepejal. Media nutrien berbeza antara satu sama lain dalam keadaan pengagregatan mereka, yang bergantung pada komposisi semasa pembuatan. Pada mulanya, kesemuanya mempunyai konsistensi cecair, dan apabila gelatin atau agar-agar ditambah dalam peratusan tertentu, campuran itu menjadi pejal.
Media kultur cecair biasanya terdapat dalam tabung uji. Sekiranya perlu untuk membiak bakteria dalam keadaan sedemikian, tambahkan larutan dengan sampel kultur dan tunggu 2-3 hari. Hasilnya boleh berbeza-beza: bentuk mendakan, filem muncul, kepingan kecil terapung atau larutan keruh terbentuk.
Medium kultur padat sering digunakan dalam penyelidikan mikrobiologi untuk mengkaji sifat koloni bakteria. Media sedemikian sentiasa lutsinar atau lutsinar supaya boleh menentukan warna dan bentuk kultur mikroorganisma dengan betul.
Persediaan media
Substrat seperti campuran daging-pepton berasaskan sup, gelatin atau agar-agar sangat mudah disediakan. Jika anda perlu membuat substrat pepejal atau separa cecair, menjadi cecairtambah 2-3% atau 0, 2-0, 3% gelatin atau agar, masing-masing. Mereka memainkan peranan utama dalam pengerasan campuran, tetapi mereka bukan sumber nutrien. Oleh itu, media nutrien diperolehi yang sesuai untuk pertumbuhan kultur bakteria.
