Kaedah untuk menyediakan tindak balas pemendakan

Isi kandungan:

Kaedah untuk menyediakan tindak balas pemendakan
Kaedah untuk menyediakan tindak balas pemendakan
Anonim

Artikel ini akan ditumpukan kepada fenomena tindak balas pemendakan. Di sini kita akan mempertimbangkan ciri-ciri rumusan fenomena ini, fenomena resapan, ciri umum, peranan dalam kehidupan manusia dan banyak lagi.

Pengenalan kepada fenomena

ciri umum tindak balas pemendakan
ciri umum tindak balas pemendakan

Kemendakan ialah fenomena jenis serologi, di mana antigen larut berinteraksi dengan antibodi dan, akibatnya, kerpasan diperhatikan - mendakan.

Ciri umum tindak balas pemendakan ialah satu bentuk pengaruh antigen dan antibodi yang diselaraskan. Jenis interaksi ini memungkinkan untuk menentukan kehadiran antigen yang tidak diketahui dalam bahan ujian dengan menambahkan antibodi dan antigen yang diketahui. Proses pemendakan tanpa kehadiran garam akan berlaku lebih teruk, dan optimum terbaik terletak dalam julat 7.0-7.4 pH.

Konstituen tindak balas

komponen tindak balas pemendakan
komponen tindak balas pemendakan

Terdapat tiga elemen utama antara komponen tindak balas pemendakan:

  1. Antigen yang mempunyai sifat molekul. Ia berada dalam keadaan jenis halus, dengan kata lain, ialarut. Juga, antigen sedemikian dipanggil precipitogen, iaitu lisat atau ekstrak tisu, dll. Precipitogen mempunyai perbezaan ciri daripada aglutinogen, yang terletak pada saiz zarah yang terdiri daripadanya. Aglutinogen mempunyai saiz sel yang wujud, dan precipitogens adalah sepadan dengan saiz molekul. Larutan antigen dicirikan oleh ketelusan.
  2. Antibodi yang terdapat dalam serum darah manusia, serta dalam serum diagnostik imun, yang mengandungi antibodi yang dikaji.
  3. Elektrolit ialah larutan natrium klorida yang isotonik.

Pengeluaran Precippitogen

Menyediakan tindak balas pemendakan adalah mustahil tanpa precipitogen, yang diperoleh dengan mengisar bahan dan mengekstrak antigen protein daripadanya. Pengekstrakan berlaku dengan merebus atau kaedah lain.

Lisat, serta ekstrak tisu dan organ, serum darah, pelbagai jenis turasan berdasarkan kultur sup mikrob, serta ekstrak garam mikroorganisma dan bahan autolisat, adalah sangat menarik. contoh precipitogens.

Menyediakan dalam kerpasan

Sekarang mari kita pertimbangkan kaedah menyediakan tindak balas pemendakan.

Tindak balas pemendakan cincin dilakukan, yang berlaku dalam tabung uji yang disediakan khas. Serum dimasukkan ke dalam rongga pinggan, menuangkannya ke dinding dengan bantuan muncung pipet. Seterusnya, jumlah precipitater yang sesuai dilapisi dengan teliti di atas, dan kemudian tiub dibawa ke kedudukan menegak dari satu mendatar. Menyediakan dan mengambil kira tindak balas pemendakan adalah operasi yang sangat teliti. Hasilnya direkodkan selepas kemunculan cincin putih pada sempadan antara antigen dan antibodi. Jika unsur tindak balas tindak balas itu sepadan antara satu sama lain, maka ia mengikat, tetapi ini menjadi ketara selepas tempoh masa yang lama interaksinya.

Tindak balas pemendakan juga dilakukan dalam cawan Petri atau pada gelas slaid, di mana gel agar-agar dipindahkan, sapukannya dalam lapisan kecil. Selepas ia mengeras dalam gel, sebilangan kecil telaga dipotong di mana antigen dan antibodi akan diletakkan. Terdapat dua cara untuk melakukan tindakan ini: kaedah imunodifusi jejarian dan imunodifusi berganda.

tindak balas pemendakan tidak digunakan
tindak balas pemendakan tidak digunakan

Maklumat am

Mekanik kerja kerpasan adalah serupa dengan peranti penggumpalan. Di bawah pengaruh serum jenis imun, antigen, yang telah memasuki tindak balas, mengurangkan tahap penyebarannya. Keadaan penting ialah ketelusan kedua-dua serum dan antigen.

Anda boleh memperbaiki pendaftaran tindak balas jika anda menindih antigen pada antibodi. Akibatnya, penampilan mendakan dalam bentuk cincin dapat diperhatikan. Fenomena ini dipanggil pemendakan cincin dan dijalankan dalam tiub khas yang mempunyai diameter 2.5 hingga 3.5 mm. Salah satu contoh tindak balas pemendakan yang paling biasa ialah diagnosis antraks.

Pemendakan memungkinkan untuk menentukan tahap ketoksikan kultur difteria dalam agar.

Semasa tindak balas yang sedang dipertimbangkanpemendakan kompleks antigen dan antibodi berlaku. Kerpasan ialah fenomena imunologi yang membolehkan anda menentukan jumlah antibodi dalam serum darah orang dan haiwan yang sakit atau divaksinasi.

Akibat Pentitratan

kaedah untuk menyediakan tindak balas pemendakan
kaedah untuk menyediakan tindak balas pemendakan

Adalah penting untuk mengetahui bahawa data yang diperoleh melalui pentitratan kaedah di atas tidak boleh diukur. Untuk mencipta dan menganalisis penilaian kuantitatif bilangan antibodi yang terkandung, teknik reaksi khas telah dibangunkan oleh M. Heidelberger dan E. Kabat, yang berdasarkan pencarian dan pengenalpastian zon kesetaraan. Mencampurkan bilangan umur antigen dengan jumlah antiserum yang berterusan membawa kepada peningkatan dalam mendakan yang terbentuk pada mulanya, dan sekali lagi ia berkurangan disebabkan oleh peningkatan keupayaan untuk melarutkan kompleks antigen. Dengan menentukan jumlah antibodi dalam supernatan yang terkandung dalam setiap tiub, anda boleh mendapati bahawa sebilangan hidangan dengan antibodi akan kehilangan cecair. Di sini, berbanding dengan tabung uji lain, mendakan terbesar akan terbentuk. Disebabkan oleh ini dan penolakan mendakan protein antigen daripada jumlah nilai protein, adalah mungkin untuk mendapatkan nilai tepat antibodi yang terkandung dalam jumlah serum khusus yang sedang dikaji. Selanjutnya, jumlah molekul protein mendakan ditentukan oleh jumlah nitrogen atau menggunakan kaedah kolorimetrik.

Penilaian nilai

penetapan dan perakaunan untuk tindak balas pemendakan
penetapan dan perakaunan untuk tindak balas pemendakan

Anggaran nilai kerpasan dalam metodologi diagnostik harus mengambil kira kemungkinan kehadiran dalam serum imun antibodi yang tidak mempunyai sifat presipitin, dari mana ia berikutan bahawa mendakan itu sendiri mungkin tidak terbentuk selepas bertindak balas dengan antigen. Senarai molekul tersebut termasuk antibodi yang tidak lengkap dan beberapa spesies daripada kumpulan globulin gamma-A.

Tindak balas pemendakan dalam keadaan makmal mendapati aplikasinya dalam pelbagai jenis pengubahsuaian. Sebagai contoh, tindak balas thermoprecipitation digunakan untuk mengesan antigen bakteria botulisme, antraks, dsb., yang tidak mengalami denaturasi haba. Tidak seperti pemendakan cincin, tindak balas jenis ini menggunakan turasan bahan yang dimaksudkan dalam keadaan mendidih.

Analisis tindak balas pemendakan dalam campuran kompleks tidak membenarkan seseorang mencirikan sifat unsur-unsur individu campuran. Dalam kes sedemikian, seseorang menggunakan kaedah pemendakan dalam agar, dan juga menggunakan immunoelectropheresis.

kerpasan meresap

tindak balas pemendakan
tindak balas pemendakan

Dalam bidang penyelidikan ini, terdapat konsep tindak balas kerpasan meresap (RPD). Ia berdasarkan keupayaan untuk meresap dalam gel antibodi dan antigen larut. Resapan ialah keupayaan molekul bahan tertentu untuk menembusi ke dalam molekul bahan lain, yang disebabkan oleh pergerakan haba.

Gel ialah sistem jenis tersebar di mana fasa cecair diagihkan sama rata dalam fasa pepejal. Selalunya, gel agar digunakan untuk tindak balas sedemikian.

Selepas memberikan parameter, dalamkeadaan di mana molekul boleh meresap antara satu sama lain, pertemuan mereka akan disertai dengan pembentukan kompleks antigen + antibodi. Neoplasma sedemikian dapat meresap, berada di dalam gel itu sendiri, dan ia akan mendakan, mengambil bentuk jalur yang boleh dikesan dengan mata kasar. Jika antigen dan antibodi adalah homolog, tiada jalur akan terbentuk.

Mewujudkan keadaan di mana resapan akan berlaku manakala dalam lapisan agar melibatkan penuangan komponen, tetapi jumlah bilangan telaga dan kedudukan relatifnya ditentukan oleh jenis tugas yang diperlukan memutuskan. RPD memberi seseorang keupayaan untuk mengesan dan mengenal pasti virus terpencil yang tidak diketahui dengan menguji menggunakan sera antibodi yang diketahui.

Permohonan

tindak balas pemendakan meresap
tindak balas pemendakan meresap

Pemendakan digunakan secara meluas bukan sahaja dalam diagnosis penyakit, tetapi juga mendapati aplikasinya dalam pemeriksaan perubatan forensik. Sukar untuk membayangkan analisis di mana adalah mungkin untuk menentukan spesies darah, bahagian organ atau tisu yang ditemui pada senjata jenayah yang tidak menggunakan tindak balas pemendakan. Semasa proses ini, sera pemendakan digunakan, yang diperoleh dengan mengimunkan pelbagai haiwan dan burung. Adalah penting bahawa paras titer serum tidak kurang daripada 1:10000, dan ia juga mesti mempunyai kekhususan yang mencukupi. Dari tempat darah yang dikesan atau keraknya, ekstrak dibuat untuk fizikal. penyelesaian, yang akan lebih terdedah kepadaserum pemendakan. Mengikut tindak balas ini, adalah mungkin untuk menubuhkan jenis tisu dan protein organ kedua-dua manusia dan haiwan. Mendapatkan ekstrak mendung memaksa seseorang menggunakan pemendakan pada agar.

Kesimpulan

Menganalisis maklumat yang dibaca, kita boleh menyimpulkan bahawa tindak balas pemendakan sangat penting bagi seseorang, kerana ia membolehkan mendiagnosis pelbagai antigen menggunakan antibodi, fenomena ini juga digunakan secara meluas dalam pemeriksaan perubatan forensik dan membolehkan anda mengenal pasti jenis darah, tisu atau organ mengikut kaitan dengan subjek tertentu. Terdapat beberapa jenis dan kaedah pemendakan, yang digunakan mengikut keperluan yang timbul bagi masalah yang sedang diselesaikan.

Disyorkan: